人类肿瘤的免疫学分析鉴定CD73为胶质母细胞瘤的组合靶标

　　抗ctla -4和抗pd -1/ PD-L1免疫检查点治疗已经完全改变了许多实体肿瘤的治疗。然而，免疫检查点治疗的临床疗效仅限于特定瘤种1、2的一部分患者。联合免疫检查点策略的多个临床试验正在进行;然而，肿瘤特异性靶向免疫检查点的机理尚不清楚。为了深入了解肿瘤特异性免疫调节靶点，我们分析了代表五种不同癌症类型的94名患者，包括对免疫检查点治疗反应相对良好的患者和对免疫检查点治疗反应不良好的患者，如多形性胶质母细胞瘤、腺癌和结直肠癌。通过mass - cytometry和single-cell RNA测序，我们发现在抗pd -1治疗后，多形性胶质母细胞瘤中存在一个独特的CD73hi巨噬细胞群体。为了测试靶向CD73对于多形成性胶质母细胞瘤的成功组合策略是否重要，我们使用CD73 /小鼠进行了反向翻译研究。我们发现，在小鼠模型中，CD73的缺失提高了用抗癌药-4和抗pd -1治疗的多形性胶质母细胞瘤的存活率。我们的数据表明，CD73作为一种特异性免疫治疗靶点，可以提高多形性胶质母细胞瘤免疫检查点治疗的抗肿瘤免疫应答，并证明多方位的人和反向翻译研究可以用于合理设计组合免疫检查点策略。免疫检查点疗法(ICT)提供持久的抗肿瘤反应的一个子集的病人与特定的瘤种3 9。较近，一些独自研究对来自单个肿瘤的肿瘤浸润性白细胞(TILs)进行了深入的单细胞分析，这些肿瘤包括肾细胞癌(RCC)、肝细胞癌(HCC)、非小细胞肺癌(NSCLC)和黑素瘤13。这些研究带来了新的见解，验证了之前关于不同癌症免疫浸润的发现，但不同癌症类型之间的应答不一致可能是瘤种特异性免疫检查点表达模式的结果，需要对多个肿瘤的TIL表型进行多方位比较。为了满足这一需求，我们应用了细胞计数技术(CyTOF)来分析85例患者的免疫细胞亚群，这些患者分别患有五种不同的瘤种:非小细胞肺癌(n=15);碾压混凝土(n = 25);微卫星不稳定性-稳定结直肠癌(CRC;n=11)、腺癌(PCa;n = 21);以及多形性胶质母细胞瘤(GBM);我们首先比较了每种瘤种中存在的主要免疫浸润(扩展数据图1)。我们观察到，NSCLC、RCC和CRC肿瘤富含CD3+ T细胞，其中CD4+FoxP3+细胞在CRC中较常见(图1a)。虽然PCa和GBM中CD3+ T细胞浸润较差，但GBM中CD68+髓细胞的丰度较高(图1a)。确定共同的表型在不同瘤种,我们执行PhenoGraph集群CD45 +细胞识别18 meta-clusters (L1 18),有八个CD3 + t细胞meta-clusters十CD3 meta-clusters,包括六个CD68 +骨髓集群和一个自然杀伤(NK)细胞meta-cluster(图1 b和扩展数据图2 a, b)。我们确定了一组六免疫元簇存在于全部五种瘤种中。这些簇显示了很高的香农熵，这是它们在瘤种中分布高度均匀性的一种度量。我们还鉴定了8个免疫元簇，显示低Shannon熵值，表明肿瘤特异性分布(图1c)。通过对不同t细胞簇频率的分析，我们发现NSCLC、RCC和CRC中存在CD3+CD4+PD-1hi和CD3+CD8+PD-1hi间簇(分别为L3和L6)(图1d和扩展数据图2c,d)。通过分析来自RCC队列的外周血单核细胞(PBMC)样本，我们发现t细胞亚群(P33和P24)分别与L3和L6群相关。有趣的是,P33和P24集群扩展的反应比nonresponders ICT(扩展数据图3 c)。我们还指出更高的丰富的CD4 + FOXP3hi调节性T细胞(L12)和CD8 + VISTA + (L14)细胞分别在CRC和PCa(图1 d和扩展数据图2 d),这可能导致缺乏应对ICT14, 15。从三种T细胞浸润瘤种(NSCLC、RCC和CRC)的30个样本中，全部CD3门控细胞的表型聚类显示了17个meta聚类。我们根据t细胞元聚类频率对全部这30例患者样本进行分层聚类，并确定了三个主要亚群(I、II和III)(图1e)。高频率的T细胞间簇，T1 (PD-1hiICOS+CD4+T细胞样亚组有L3)和T4 (PD-1hiCD8+ T细胞L6样)II，主要由NSCLC和RCC组成，这两种肿瘤对ICT反应良好(图1f)。III亚组中，T2 (CD4+ T细胞)和T3 (CD8+)间簇出现频率较高（T细胞)表达明显低于检查点受体表达。

　　参考文献：Doi：10.1038 / s41591-019-0694-x

• 文章标题：人类肿瘤的免疫学分析鉴定CD73为胶质母细胞瘤的组合靶标
• 更新时间：2020-12-10 15:41:09